جداسازی، طبقه بندی و شناسایی سوش های استرپتومایسز به روش کموتاکسونومی

سابقه و هدف: اکتینومایست گروهی از باکتری های گرم مثبت رشته ای شکل هستند که به لحاظ پاره ای از شباهت های ظاهری به قارچ ها، سالیان متمادی در قلمرو اوکاریوت ها مورد بررسی و مطالعه قرار می گرفتند. این باکتری ها در زمینه علوم پزشکی و بیوتکنولوژی اهمیت زیادی دارند، چنان که بعضی از جنس های آن قادرند بیماری های عفونی حاد و مزمنی در انسان و حیوانات ایجاد نمایند. به علاوه بعضی از انواع (استرپتومایست) توانایی تولید آنتی بیوتیک های مختلف را دارند که نوع و میزان آن در بین گونه ها بسیار متفاوت است. مواد و روش ها: پنجاه نمونه خاک از مناطق مختلف کشور جمع آوری و با استفاده از روش رقت پلیت 140 کلنی خالص با ویژگی های استرپتومایسز به دست آمد. 88 سوش از بین آن ها انتخاب و به روش کروماتوگرافی لایه نازک (tlc)، محتوای دیواره سلولی آن ها دقیقاً شناسائی گردید. ابتدا اسید های آمینه دیواره سلولی باکتری ها هیدرولیز و توسط اتر دوپترول شستشو تا چربی ها در فاز اتری کاملاً حل و جدا شوند. از عصاره های صاف شده با استفاده از لوله های موئین لکه هایی با فواصل 2 سانتی متر از هم بر روی صفحات20*20 سانتی متری کروماتوگرافی گذاشته شد. در ابتدا و انتهای صفحه کروماتوگرافی دو لکه استاندارد قرار گرفت . در نهایت هرصفحه دارای 8 نمونه و دو لکه استاندارد گردید. یافته ها: پس از ظاهر شدن لکه ها، ایزومرهای دی آمینو پایمیلیک اسید ( dap) به رنگ سبز زیتونی متمایل به زرد با rf های متغیر و سایر اسیدهای آمینه به رنگ ارغوانی نمایان گردید که از طریق مقایسه با استاندارد مورد تفسیر قرارگرفتند. به علت حضور ایزومر چپ گرد دی آمینو پایمیلیک اسید در صفحات ، مشخص شد که 97% نمونه های مورد آزمایش استرپتومایسز بودند. نتیجه گیری: کموتاکسونومی روشی مناسب برای شناسایی گونه های استرپتومایسز می با شد.